Текущее время: 18 апр 2021, 05:29

Часовой пояс: UTC + 5 часов




Начать новую тему Ответить на тему  [ 1 сообщение ] 
 63.Твердофазный иммуноферментный анализ 
Автор Сообщение
Сообщение 63.Твердофазный иммуноферментный анализ
63.Твердофазный иммуноферментный анализ
На рис. 1а показана общая схема метода, состоящего из трех стадий, соединенных на рисунке знаком плюс. Образования иммунного комплекса. На твердой поверхности пластиковой лунки, изображенной на рисунке слева, сорбирован Ag любого инфекционного агента (фрагмент вируса, бактерии, простейшего и т.п.). В эту лунку вносится исследуемый биологический материал, чаще всего сыворотка крови больного. Если в ней содержатся Ab к инфекционному агенту (на рисунке обведены), то они закрепляются на соответствующих Ag и остаются связанными при промывке. На этом первая стадия заканчивается. Это основная — "специфическая" стадия процесса
На второй стадии анализа в лунку вносят Ab с заранее прикрепленным к ним ферментом, способные связаться с Ab человека, закрепившимися на инфекционном агенте. Это так называемый конъюгат. Если в ячейке имеются образовавшиеся на первой стадии процесса иммунные комплексы, то возникает “молекулярная цепочка”, на конце которой находится фермент - пероксидаза. На следующей стадии в лунку добавляется раствор бесцветного вещества — хромогена (в лекциях ортофенилендиамин). Это вещество приобретает окраску после расщепления его присутствующим в ячейке ферментом – перексидаза (рез-т положит). Если все элементы цепочки присутствуют, в лунке образуется окрашенный комплекс. Если на первой стадии анализа иммунных комплексов не образовалось, то отсутствует и вся последующая часть “молекулярной цепочки”, вследствие чего ортофенилендиамин не окрашивает раствор (рез-т отрицательный). Анализ способности некоторых из Ab в исследуемом материале, связаться с интересующим нас Ag.
Определение антигенов - Иммуноблокинг
Для обнаружения самих инфекционных агентов, а точнее — их Ag, применяется другая модификация метода тИФА, рис. 2а. В этом случае на поверхности целлюлозы (твердой фазе) сорбируются Ab (несколько) к искомому агенту. Образующаяся в ходе анализа цепочка выглядит так: Ab, инфекционный агент, а далее, как и в предыдущем случае, следует комплекс Ab-F. То есть, если в исследуемом образце присутствует искомый Ag, то образуется иммунный комплекс. В ячейке присутствует пероксидаза, который способен расщеплять ортофенилендиамин с образованием окрашенного продукта (рис. 26). Это возможно только при наличии полной цепочки. Если в исследуемом образце искомый Ag (обведен на рис. 2а) отсутствует, то цепочка не образуется, и окрашивания не происходит

_________________
http://splav-katamaran.ru | http://katamaran-ural.ru - Прокат катамаранов и организация сплавов по рекам Урала! Екатеринбург. +79501965005 katamaran.ural@mail.ru


25 дек 2010, 10:57
Профиль Отправить личное сообщение
Показать сообщения за:  Поле сортировки  
Начать новую тему Ответить на тему  [ 1 сообщение ] 

Часовой пояс: UTC + 5 часов



Кто сейчас на конференции

Сейчас этот форум просматривают: нет зарегистрированных пользователей и гости: 1


Вы не можете начинать темы
Вы не можете отвечать на сообщения
Вы не можете редактировать свои сообщения
Вы не можете удалять свои сообщения
Вы не можете добавлять вложения

Найти:
Перейти:  
cron
Powered by phpBB © phpBB Group.
Designed by Vjacheslav Trushkin for Free Forums/DivisionCore.
Вы можете создать форум бесплатно PHPBB3 на Getbb.Ru, Также возможно сделать готовый форум PHPBB2 на Mybb2.ru
Русская поддержка phpBB