23. Рестриктазы, лигазы, обратная транскриптаза как инструме
Рестриктазы – это ферменты разрезающие ДНК по определенным нуклеотидным последовательностям. Главный инструмент генной инженерии. Рестриктазы – ферменты внутриклеточного иммунитета. После удаления Рестриктазы ДНК восстанавливаются.
Все ферменты делят на:
1. используемые для получения фрагментов ДНК
2. синтезирующие фрагменты ДНК на матрице ДНК
3. соединяющие фрагменты ДНК
4. позволяющие осуществлять изменение структуры концов фрагментов ДНК
5. применяемые для приготовления гибридизированных проб.
Каждый фермент, способный разрушить чужеродное ДНК, опознает в ней специфическую последовательность из 4-6 нуклеотидов. Соответств. последовательности в геноме бактерий замаскированы метированием остатков с помощью метилаз. ДНК - лигазы – ведут сшивку олигонуклеомидов между собой с образованием 2-х цепочных нуклеомидов. Ревертазы - (обратная транскриптаза) (РНК -зависимая ДНК-полимераза)- фермент РНК-содержащих вирусов, осуществляющих обратную транскрипцию, т.е. синтез ДНК провирусов на матрице вирусной РНК.
Векторы-переносчики –(плоумиды, вирусы)-это транскриптн. механизмы для ген. инф-ии.